Akademik Veri Yönetim Sistemi
Tezin Türü: Doktora
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Uludağ Üniversitesi, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2003
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: Ş. CANAN MIZRAK
Danışman: HATİCE ERDOST
Özet:Bu çalışmada, CAP'in (capsaicin) A 303 ve A 304 spermatogenik kök hücre hatlarında doza ve süreye bağlı olarak ne şekilde etki gösterdiği ve spermatogenik prosesde meydana gelen apoptozis olgusu üzerinde etkileri konularına ışık tutulması amaçlandı. A 303 ve A 304 hücre hatlarında kontrol gurubu ve deney grupları 250 uJVI, 200 uM, 150 uM, lOOuM, 50 uM ileluM olarak CAP konsantrasyonlarında oluşturuldu. Kontrol gurubunda CAP'in en yüksek konsantrasyonuna eşit DMSO (dimetilsülfoksit) ilavesi yapıldı. Oluşturulan tüm gruplarda XTT kit deneyi gerçekleştirildi. XTT deneyinin sonucunda lOOuM, 50 uM, luM grupları elenerek, 250 uM, 200 uM ve 150pM grupları ile çalışıldı. Pasajların sonlandırma zamanlan 24 ve 48 saatler olarak tespit edildi. Apoptotik hücreleri gözlemek ve görüntülemek amacıyla Nomarski mikroskobu kullanıldı. Apoptozisin immunositokimyasal anlamda belirlenmesi amacıyla anti-activated caspase 3 antikoru ile boyamalar yapılarak ışık mikroskobuyla, VR-Pin hücre hatlarında varlığını tespit etmek için ise immunofluoresan işaretleme yapılıp, sonuçlar konfokal mikroskop ile değerlendirildi. Apoptotik hücrelerin sayısal oranlarını tespit etmek amacıyla nükleer fragmantasyon belirleme protokolü uygulanmış hücreler PI (Propidium Iodide) ile boyandılar ve flow sitometri cihazında Al (apoptotik indeks) ölçümü yapıldı. Bu ölçümlerin sonucunda elde edilen apoptotik hücrelerin sayısal oranlan Kruskal Wallis NPar Tests'in Wilcoxon Signed Ranks Testi ile değerlendirildi. Bu verilerin desteklenmesi amacıyla radyoaktif timidin f3!!] bağlanması deneyi gerçekleştirildi. CAP'in 24 ve 48 saat sürelerince 3 farklı konsantrasyonla A 303 ve A 304 spermatogenik kök hücre hatlarında apoptozis olgusuna etkileri incelenip, CAP'in spermatogenik prosesi, doza ve süreye bağlı olarak etkilediği sonucuna varıldı. Bu çalışmada aynca, VR-l'in A 303 ve A 304 spermatogenik kök hücre hatlarında varlığının gösterilmesiyle hücre içi sinyal ileti mekanizmaları daha net bir şekilde ortaya konuldu.