Normal ve dejenere myelinin ışık ve elektron mikroskobik incelenmesinde mikrodalga ışınımının kullanımı


Tezin Türü: Doktora

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Bursa Uludağ Üniversitesi, SAĞLIK BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2003

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: Berrin Avcı

Danışman: ZEYNEP KAHVECİ

Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu

Özet:

Normal ve dejenere myelinin histolojik preparasyonunda kullanılan klasik yöntemler uzun süren, zahmetli uygulamalar gerektirir. Sinir dokusunun ışık ve elektron mikroskobik fiksasyonu ve boyanmasında mikrodalga kullanımı, kaliteyi arttırmak, standardizasyonu sağlamak, zaman ve kullanılan kimyasallar açısından ekonomik bir çalışma gerçekleştirmek amacıyla önerilmektedir. Bu çalışmada amaç; santral ve periferik sinir sisteminde normal ve dejenere myelinin ışık ve elektron mikroskobik incelenmesinde fiksasyon aşamalarında, ışık mikroskobik düzeyde boyanmasında mikrodalga ışınımını kullanarak eşit kalitede preparat elde etmek, preparasyon süresini kısaltarak patoloji laboratuvarlarında demyelinizan hastalıkların tanısında kullanılabilecek kısa süreli boyama prosedürünü gerçekleştirmektir. Normal myelinin incelenmesi için sıçan beyin ve siyatik siniri çalışıldı. Myelin dejenerasyonu oluşturmak amacıyla deney grubunu oluşturan sıçanlara orta serebral arter oklüzyonu ve siyatik sinir tam kesişi uygulandı. Işık ve elektron mikroskobik inceleme için dokular konvansiyonel şartlarda ve mikrodalga ışınımı yardımıyla fikse edildi. Normal myelin boyanmasında Weil ve Kluver-Barrera metotları, dejenere myelinin boyanmasında Marchi metodu kullanıldı. Bu metotlar konvansiyonel şartlarda ve mikrodalga ışınımı yardımıyla iki fiksasyon grubuna da uygulandı. İki gün süren ışık mikroskobik fiksasyon süresi mikrodalga grubunda 16.5-18.5 dakikada gerçekleşti. Elektron mikroskobik ikili fiksasyon 19 dakikada tamamlandı. Weil metodunda boyama süresi 2 dakikaya, Kluver-Barrera metodunda 15 dakikaya düşürüldü. Klasik Marchi metodunda 10 gün süren dejenere myelin boyanması, beyin dokusunda 7 saatte, siyatik sinirde 1 saatte gerçekleşti. Ayrıca, konvansiyonel yöntemle hazırlananlara eşit kalitede preparat elde edildi. Bu bulgularla, normal ve dejenere myelinin ışık ve elektron mikroskobik incelenmesinde mikrodalga ışınımının kullanılabileceği sonucuna varılmıştır.