Akademik Veri Yönetim Sistemi
26. ULUSAL İMMÜNOLOJİ KONGRESİ, Ankara, Türkiye, 11 - 13 Kasım 2023, ss.67, (Özet Bildiri)
Amaç: HL-60 hücre hattı, akut miyeloid lösemi hücre hattı olmakla beraber farklı miyeloid matürasyon düzeyindeki
çalışmalarda model olarak kullanılmaktadır. Bu hücrelerin bazı faktörlerle granülosit ve/veya monosit/makrofaj benzeri
hücrelere farklılaştığı bilinmektedir. Miyeloid kökenli baskılayıcı hücreler(MKBH) kronik inflamasyon sonucunda farklı
matürasyon düzeylerinde kemik iliğinden çıkarak periferik dolaşıma katılan,immun regülasyon yapabilen miyeloid hücre
topluluğudur.Bu hücreler birçok patolojide kilit role sahip olmakla birlikte mekanistik çalışmalarda kullanılabilecek bir hücre
hattı yoktur!Bu çalışmada all-trans retionik asit (ATRA), 1a,25-dihidroksivitaminD3(D3) ve MDA-MB-231 hücrelerinden
salgılanan faktörlerin HL-60 hücrelerinde MKBH-benzeri dönüşüme olan etkileri incelenmiştir.
Materyal ve Method: MKBH-benzeri hücreleri belirleyebilmek için HL-60 hücreleri ATRA ve D3 ile 24,48 ve 96saat uyarıldı
ayrıca farklılaşması uyarılmış bu hücreler 48saat LPS veya IFN-g ile uyarıldı.HL-60 hücreleri MDA-MB-231 hücreleri ile
72saat ve 8gün ko-kültür edildi.Tüm koşulların inkübasyon süresi sonunda HL-60 hücrelerinin Giemsa boyaması ile
morfolojisi, akım sitometri ile CD11b,CD11c,CD14,CD15,CD16,CD33,CD40,CD62L,CD66b,CD70,CD114,
TRAİL,TLR4,HLA-DR ve LOX-1 yüzey belirteçleri değerlendirildi. Ayrıca ATRA ve D3 ile uyarılan HL-60 hücrelerinin T
hücre proliferasyonuna etkisi ile ROS (Reaktif oksijen türleri) ve NO (nitrik oksit) üretim kapasitleri araştırıldı. MKBH ilişkili
NOX2,MPO,COX2,IDO1,NOS2,ARG1,ARG2 genlerinin ekspresyonu RT-PCR ile değerlendirildi.HL-60 ko-kültür edilen
MDA-MB-231 hücrelerinin metastatik karakteri(scratch assay) incelendi.
Bulgular ve Sonuç: HL-60 hücrelerinin morfolojisinin ATRA ve D3 ile olgun hücre morfolojisine kaydığı görüldü.HL-60 ile
ko-kültür edilen MDA-MB-231 hücrelerinin metastatik özelliğinin arttığı görüldü.ATRA ve D3 ile uyarılan hücrelerde NO
üretimi ve NOS2 mRNA düzeyinde bir farklılık görülmedi.Ancak ATRA ile uyarılan hücrelerde ROS üretimi,NOX2 ve MPO
mRNA ekspresyon düzeyi artmaktaydı.Tüm koşullarda CD11b pozitifliği kontrole göre artarken;CD14 pozitifliği özellikle D3
ile uyarılan hücrelerde artış gösterdi.MDA-MB-231 ile ko-kültürlenen HL-60’larda CD11b’yi yüksek ifade eden hücrelerde
CD114 ve LOX-1 ekspresyonun arttığı görüldü.Özellikle 8.gün ko-kültür sonrası bakılan LOX-1 ekspresyonunun daha da artışı
dikkat çekti.Tüm bu bilgiler ışığında ATRA ile uyarılan HL-60 hücrelerinde ROS ve granülositik-MKBH farklılaşmasını
uyaran genlerdeki eskpresyonun artmış olması,MDA-MB-231 ile ko-kültürlenen HL-60 hücrelerinin CD114 ve özellikle LOX-
1 yüzey belirtecindeki ekpresyonların artışı MKBH benzeri bir alt populasyonun olabileceğini göstermektedir.Yapılacak ileri
çalışmalar ile bu iki grubun farklılık ve benzerlikleri incelenecektir.