Akademik Veri Yönetim Sistemi
5TH INTERNATIONAL EURASIAN CONFERENCE ON BIOLOGICAL AND CHEMICAL SCIENCES, Ankara, Türkiye, 23 - 25 Kasım 2022, ss.1273-1280
Günümüzde önemi giderek artan İnflamatuar Bağırsak Hastalığı’nın (IBD) tedavisinde TNF-alfa inhibitörleri
yaygın olarak kullanılmakla birlikte hastaların tedavisinde istenilen başarıya ulaşılamamış olması ve uzun
süreli TNF- alfa inhibitörlerinin kullanımının neden olduğu ciddi olumsuzluklar yeni tedavi yöntemlerinin
geliştirebilmesine ihtiyaç oluşturmuştur. Anti-inflamatuar, anti-oksidan ve anti-kanserojenik etkilere sahip bir
flavonoid olan mirisetinin TNF-alfa inhibitörlerinin olumsuz etkilerini önlemedeki rolü bilinmemektedir.
Mevcut çalışmada, in-vitro IBD ortamında mirisetinin TNF-alfa inhibitörü ile birlikte kullanımının etkinliğinin
araştırılması ve bu flavonoidin IBD’li hastalarda TNF-alfa inhibitörleri ile birlikte kullanılabilirliğinin test
edilmesine yönelik yeni ileri in-vivo projelerin yapılandırılmasına ön veri oluşturulması hedeflenmektedir.
Kolon adenokarsinom hücre hattı olan HT-29, E. Coli endotoksini olan Lipopolisakkarit (LPS) ve TNF-alfa
ile inflamasyon gelişimi uyarılarak in-vitro IBD ortamı oluşturuldu. Mirisetin’in tek başına ve IBD’li hastaların
tedavisinde kullanılan TNF-alfa inhibitörü olan infliximab ile kombin halde kullanımıyla hücre proliferasyonu
XCelligence yazılımıyla değerlendirildi. % 70’ten fazla canlılık sağlayabilen mirisetin dozlarının tek başına
ve infliximab ile kombinasyon halindeki muamelelerinin HT-29 hücrelerinin invazyon yeteneği üzerine olan
etkileri yara iyileşmesi deneyiyle analiz edilerek ImageJ yazılımıyla değerlendirildi. Mirisetin’in HT-29 hücre
hattı üzerinde hücre proliferasyonu testi sonucunda 24h için LD50 dozu 39,56 µM, % 70’ten fazla canlılık
sağlayabilen dozu ise 12,5 µM olarak belirlendi. Mirisetin’in 12,5 µM’lık öldürücü olmayan dozu ile
gerçekleştirilen yara iyileşmesi deneyi sonucunda kontrol yara alanında % 29,24 kapanmaya, mirisetin %
18,63 kapanmaya, infliximab % 11,69 kapanmaya, mirisetin + infliximab % 17,08 kapanmaya neden olduğu
gözlendi (p<0.0001). Bulgularımız mirisetinin ölümcül olmayan dozlarının HT-29 hücrelerinde infliximab ile
benzer etkiye sahip olabileceğini göstermiştir. Bu sebeple mirisetinin IBD tedavisine yönelik ileri in-vivo
projelerin yapılandırılmasında kullanılabilirliğinin olduğu öngörülmüştür.
TNF-alpha inhibitors are widely used in the
treatment of Inflammatory Bowel Disease (IBD), which is becoming increasingly important
today. The lack of success in the treatment of patients and the serious
problems caused by the long-term use of TNF-alpha inhibitors have created a
need to develop new treatment methods. The role of myricetin, a flavonoid with
anti-inflammatory, anti-oxidant and anti-carcinogenic effects, in preventing
the adverse effects of TNF-alpha inhibitors is unknown. In the current study,
it is aimed to create preliminary data for the construction of new advanced
in-vivo projects to investigate the efficacy of myricetin combined with
TNF-alpha inhibitor in the in-vitro IBD environment and to test the usability
of this flavonoid with TNF-alpha inhibitors in patients with IBD. In-vitro IBD
environment was created by stimulating the development of inflammation with
colon adenocarcinoma cell line HT-29, E. Coli endotoxin Lipopolysaccharide
(LPS) and TNF-alpha. Cell proliferation was evaluated with XCelligence software
with the use of myricetin alone or in combination with infliximab, a TNF-alpha
inhibitor used in the treatment of patients with IBD. The effects on the
invasive ability of HT-29 cells of treatment with doses of myricetin alone and
in combination with infliximab, which can provide more than 70% viability, were
analyzed by wound healing assay and evaluated with ImageJ software. As a result
of the cell proliferation test of myricetin on the HT-29 cell line, the LD50
dose was determined as 39,56 µM for 24h, the dose that could provide more than
70% viability was 12.5 µM. As a result of the wound healing experiment
performed with a 12.5 µM non-lethal dose of myricetin, 29.24% closure in the
control wound area, 18.63% closure with myricetin, 11.69% closure with
infliximab, and 17.08% closure with myricetin + infliximab. was observed
(p<0.0001). Our findings showed that non-lethal doses of myricetin can have
a similar effect to infliximab in HT-29 cells. For this reason, myricetin has
been predicted to have utility in structuring advanced in vivo projects for the
treatment of IBD.